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動物模型是現(xiàn)代生物醫(yī)學研究中重要的實驗方法與手段,有助于更方便、更有效地認識人類疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和研究防治措施,同時大鼠、天竺鼠、小鼠、少部分非人靈長類等動物由于諸多優(yōu)勢在生命科學、醫(yī)學研究及藥物開發(fā)等多個領(lǐng)域應用日益增多。近年來各種影像技術(shù)在動物研究中發(fā)揮著越來越重要的作用,涌現(xiàn)出各種動物成像的專業(yè)設備,為科學研究提供了強有力的工具。
動物活體成像技術(shù)是指應用影像學方法,對活體狀態(tài)下的生物過程進行組織、細胞和分子水平進行定量和定性的分析,對藥物療效進行成像,從病理水平到評估疾病的發(fā)展進程。
活體成像的實驗方法主要主要分為光學成像 (optical imaging)、核素成像(PET/SPECT)、核磁共振成像(magnetic resonance imaging ,MRI)、計算機斷層攝影(computed tomography,CT)成像和超聲(ultrasound)成像五大類。
目前實驗室常用的有生物發(fā)光(bioluminescence)和熒光(Fluorescence)兩種技術(shù)。
那么主要的應用在以下幾個方面:
(1)標記細胞,如癌細胞及藥物研究、細胞凋亡等。
(2)標記RNA或DNA,尤其是基因治療方面的應用。
(3)標記基因,如轉(zhuǎn)基因動物模型研究,基因表達研究。
(4)標記細菌,如研究蛋白相互作用、代謝等。
Biospace Lab 5D清醒動物活體成像系統(tǒng),是獨家動物全定量式多維光學動態(tài)采集系統(tǒng)。
成像系統(tǒng)由諾貝爾物理學獎獲得者Georges Charpak教授及其團隊研發(fā),采用增強型CCD芯片作為其核心成像組件并集成各種優(yōu)化設計。且可以在動物完全清醒的狀態(tài)下,用于動物體內(nèi)外生物發(fā)光或熒光信號的檢測、定位、量化動態(tài)。避免了麻醉藥物對分子探針在體內(nèi)的分布,全球業(yè)界最靈敏光學檢測系統(tǒng)< 40 photons/s/sr/cm2。
關(guān)于5D清醒動物活體成像
技術(shù)優(yōu)勢:
1、超高靈敏度
無論是體內(nèi)還是體外的成像觀察,對于少量細胞的觀察仍然可以實現(xiàn)。
圖1 體內(nèi)外觀察不同數(shù)量細胞的成像情況
2、實時采集跟蹤信號
(1)實時定量成像
如小鼠胚胎的信號觀察傳統(tǒng)成像(圖2)于Biospace Lab實時成像觀察(Movie 1),解決了傳統(tǒng)成像的局限,可以實時觀察檢測信號。
圖2 傳統(tǒng)成像
Movie 1:Biospace Lab實時成像
(2)藥物代謝觀察
實時觀察不同個體間的藥物代謝動力學差異
Movie 2:經(jīng)過藥物處理的實驗動物,Biospace Lab實時觀察個體間的代謝差異
3、獨家清醒動物成像
需要觀察的動物在完全清醒的狀態(tài),可自由移動,接近于自然的狀態(tài),同時觀察和采集動物的信號(Movie 3和Movie 4)
Movie 3:生物發(fā)光標記腫瘤細胞
Movie 4:ROI區(qū)域成像和定量
4、四個面成像3維空間立體定位信號
一次可以得到4個正交平面的空間信息(圖3)以及3維立體空間信號信息(Movie 5)
圖3 四面成像視野
Movie 5:Biospace Lab成像得到的3維空間立體定位信號
5、多模態(tài)融合成像
圖4 Biospace Lab和U-CT拍攝注射100ul熒光素后的效果展示
6、激光精確掃描斷層成像
TomoFluo采用縝密深層影像演算法,充分考慮光在動物體內(nèi)傳播的發(fā)散及吸收效應、組織異質(zhì)性等因素,可穿透整個實驗體,得到不同深度的3D熒光斷層數(shù)據(jù)并且精確定量,并因此進行3D重建(圖5)。能夠獲取熒光探針的濃度資訊、量化資訊(如fmol)、深度資訊及體積資訊等等,于分析上是絕對真實定量。
圖5 TomoFluo反射及穿透激發(fā)?式以固態(tài)激光進?透射掃描
7、支持X-Ray成像
X-ray成像最多10只小鼠同時成像,比如,成骨標記物成像的應用(圖6),方便節(jié)約時間。
圖6 成骨標記成像
關(guān)于應用:
Biospace Lab 5D清醒動物成像應用廣泛,可以應用在生命科學研究的各個領(lǐng)域:腫瘤研究、干細胞研究等等,可以標記細胞、病毒、基因、蛋白等研究各自的分布甚至功能;
對于一些特殊的研究,比如腦科學、睡眠-喚醒循環(huán)、動物行為學等需要對清醒狀態(tài)下的動物行為、運動等進行觀察,需要可以在時間、空間上對小動物的狀態(tài)進行整合研究。